一、使用前检查：
 1.接通生物安全柜的电源。
 2.打开风机开关，运转风机，检查高效过滤器出风面是否有风送出。
 3.检查照明及紫外设备能否正常运行。
 4.工作前必须对生物安全柜周围的环境及空气进行洁净处理，认真进行清洁工作，并用臭氧消毒法进行杀菌处理。
 5.操作前应将实验操作所需的物品全部移入生物安全柜，避免人员在操作过程中手臂频繁穿过气幕而破坏气流。
二、使用：
 1.使用生物安全柜时，先用70%的酒精或消毒剂擦拭生物安全柜台面。并打开紫外线杀菌灯。
 2.60分钟后，关闭紫外线灯，打开送风机。
 3.打开风机5～10分钟，等柜内空气净化好并气流稳定后再进行实验操作。将双臂缓缓伸入安全柜内，静止至少1分钟，使柜内气流稳定后再进行操作。
 4.生物安全柜内不得放与本次实验无关的物品。柜内物品摆放应做到清洁区、半污染区与污染区基本分开，操作过程中物品取用方便，且三区之间无交叉。物品应尽量靠后放置，但不得挡住气道口，以免干扰气流正常流动。
 5.工作时尽量减少背后人员走动以及快速开关房门，以防止安全柜内气流不稳定。
 6.工作时不要将移门移过安全线的高度（200mm处），应保证操作者脸部在工作窗口之上。若移门开口抬高至200mm以上，则有气流不能平衡的危险。（当移门门开口抬高到200mm以上时，则蜂鸣叫报警）。在柜内操作时动作应轻柔、舒缓，防止影响柜内气流。
 7.操作结束后，清理工作台面，收集各类废弃物，关闭风机及照明开关，用清洁剂及消毒剂擦拭消毒。
 8.工作完全后，关闭玻璃窗，保持风机继续运转10～15分钟，同时打开紫外灯，照射30分钟，关闭紫外灯，切断电源。
三、保养：
 1.生物安全柜工作环境应在：温度18—26℃；湿度：45—65%的洁净区工作，电源应设有专门开关。
 2.日常维护保养需要消毒和清洁工作室，对操作台面进行清洁和消毒时要用柔性清洁剂清洁箱体和外表玻璃。当生物安全柜使用一段时间后，应作性能检测（一般每两月一次)，用风速仪测量工作区风速(送风风速0.3m/s,工作窗口进风速0.55m/s),如发现不符合技术参数的要求,则可调大风机供电电压。
 3.当风机电压调到最大时,工作区风速仍达不到技术特性中规定的风速时,则必需更换高效空气过滤器,更换送风高效空气过滤器时也必需更换排风高效空气过滤器,更换完毕后,应用尘埃粒子计数器检查四周密封是否良好,若有泄漏需用密封胶封堵,洁净度按百级标准测试合格.换下来的高效空气过滤器需经高温灭菌后,用朔料袋密封,送至公司废物处治箱,统一处理。
 4.定期进行无菌状况测定，方法为取普通肉汤培养基三个分置台上，左中右开盖30分钟，在适宜温度下培养48小时，应无菌生长。
四、清洁：
 1.按《清洁剂配制标准操作规程》配制清洁剂（1%洗洁精），按《消毒剂配制标准操作规程》配制消毒剂（75%酒精，0.2%新洁尔灭）。
 2.准备好清洁与消毒用的工具（抹布、塑料桶等）。
 3.每次测定结束后，将工作台上所有物品撤离，然后开展清洗、消毒工作。
 4.先用蘸清洁剂的抹布自上而下由里至外擦拭生物安全柜内壁台面和外壁，然后用蘸纯化水的抹布擦拭去清洁剂，最后用蘸消毒剂的抹布擦拭内壁台面和外壁，15分钟后，用蘸纯化水的抹布擦拭去消毒剂。
 5.消毒完毕，开启紫外线灯30分钟，进行空间消毒。
 6.消毒剂必须每月交换使用。
 7.每次使用完毕，立即清洁仪器，并填写仪器使用记录。
 8.要经常用抹布沾上75%酒精将紫外线杀菌灯表面擦干净,保持表面清洁,否则会影响杀菌能力.
 9.清洁效果评价：设备内外表面应该光亮整洁，没有污迹。